SERANA 无血清冻存液WXQA100

细胞冻存步骤

1.  常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。

2.  根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。

3.  将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。

4.  加入适量的细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。

5.  将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。

6.  直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。

7.  如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。

冻存细胞复苏步骤

1.  从冰箱中取出冻存的细胞，立即放入37℃水浴槽中快速解冻。

2.  待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1ml细胞培养基于冷冻管中与细胞混合,将其中的混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中,1000rmp,5分钟离心收集冻存细胞沉淀,移去上清液(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去)。

3.  加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。

4.  镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。

注意事项

1．取用冻存液均要在超净工作台内无菌操作 。

2．初次使用融化后可在2-8℃避光保存至少1个月，少量蛋白析出不影响冻存效果。

3．冻存时从室温可快速降到0℃，再降温时一般按每分钟降温1～2℃，待降至-70℃以下时可放入液氮中，在液氮中细胞可保存数年或更长时间。

4.在进行细胞培养过程中，应注意无菌操作，避免被微生物污染。

5.本产品仅用于科研或进一步研究使用，不用于诊断和治疗。